德國cellendes的三維(3D)水凝膠系統(tǒng)是一套用于三維(3D)細(xì)胞培養(yǎng)時構(gòu)建細(xì)胞外基質(zhì)組分的試劑。使用者可以利用這些試劑控制細(xì)胞外環(huán)境,設(shè)計適合細(xì)胞生存的3D系統(tǒng)。
三維(3D)水凝膠系統(tǒng)與活體細(xì)胞外基質(zhì)相似,采用該系統(tǒng)可使體外細(xì)胞培養(yǎng)更接近體內(nèi)的生理特征,是基礎(chǔ)研究、藥物篩選和再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域細(xì)胞功能研究的理想選擇。
如何選擇三維水凝膠試劑盒,請參看下文:
三維水凝膠系統(tǒng)主要有兩(三)部分組成:
1. maleinide-functionalized polymer(馬來酰亞胺基團(tuán)---聚合物)
2. thiol-functionalized crosslinker(硫醇基團(tuán)---交聯(lián)劑)
3. RGD peptide(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽)
(注:其中polymer 和crosslinker是必須的,RGD peptide需根據(jù)實驗選擇是否添加)
maleinide-functionalized polymer有兩種:
maleinide-PVA(馬來酰亞胺—聚乙烯)
maleinide-Dextran(馬來酰亞胺—葡聚糖)
thiol-functionalized crosslinker有兩種:
PEG-link(聚乙二醇交聯(lián)劑)
CD-link(聚乙二醇—MMP多肽交聯(lián)劑)
其中一種Polymer和一種crosslinker組合,培養(yǎng)細(xì)胞,就可讓細(xì)胞呈三維狀態(tài)。
1. Polymer的選擇決定了細(xì)胞是否能夠被人為的回收
2. crosslinker的選擇決定了細(xì)胞是否能夠降解局部水凝膠來為自己創(chuàng)造移動空間
3. RGD多肽可以為細(xì)胞提供可粘附的細(xì)胞外環(huán)境,這也是絕大多數(shù)細(xì)胞擴(kuò)散和遷移的先決條件
指的是maleinide-PVA或maleinide-Dextra。其中 maleinide-PVA不能進(jìn)行降解,而maleinide-Dextran可被葡聚糖酶,即可人為降解。
指的是粘附多肽 RGD peptide(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽),將細(xì)胞粘附到maleinide-PVA上,讓細(xì)胞在牢固的矩陣中。同時,RGD peptide還可以誘導(dǎo)細(xì)胞的極化。
細(xì)胞根據(jù)黏連受體,結(jié)合到polymer-peptide上
指的是PEG-link或CD-link。其中PEG-link穩(wěn)定,不被降解,而CD-link是在PEG-link上加上MMP多肽,因此可被細(xì)胞自身分泌的基質(zhì)金屬蛋白酶破壞MMP肽,從而能夠局部降解,為自己創(chuàng)造移動空間(如需觀測細(xì)胞的伸展、遷移,需選用CD-link,還需選用RGD肽)
各種組合的區(qū)別
1. 3D PVA-PEG水凝膠試劑盒(maleinide-PVA和PEG-link組合):
水凝膠不能降解,即細(xì)胞不能回收,細(xì)胞不能伸展和遷移
2. 3D Dextran -PEG 水凝膠試劑盒(maleinide-Dextran和PEG-link組合):
可人為降解(添加葡聚糖酶),即細(xì)胞可回收,細(xì)胞不能伸展和遷移
3. 3D PVA-CD水凝膠試劑盒(maleinide-PVA和CD-link組合):
水凝膠不能降解,細(xì)胞自身分泌基質(zhì)金屬蛋白酶,可為自己創(chuàng)造移動空間,細(xì)胞不能伸展和遷移。如想觀測細(xì)胞的遷移和伸展,需在凝膠中添加RGD肽。
4. 3D Dextran–CD水凝膠試劑盒(maleinide-Dextran和CD-link組合):
可人為降解(添加葡聚糖酶),細(xì)胞自身分泌基質(zhì)金屬蛋白酶,可為自己創(chuàng)造移動空間,細(xì)胞不能伸展和遷移。如想觀測細(xì)胞的遷移和伸展,需在凝膠中添加RGD肽。
3D PVA-PEG 水凝膠試劑盒 | 3D PVA-CD 水凝膠試劑盒 | 3D Dextran -PEG 水凝膠試劑盒 | 3D Dextran–CD 水凝膠試劑盒 | |
Mal-PVA | 170ul | 170ul | / | / |
Mal-Dextran | / | / | 170ul | 170ul |
PEG-link | 200ul | / | 200ul | / |
CD-link | / | 200ul | / | 200ul |
Dextranase | / | / | 500ul | 500ul |
10×CBpH5.5 | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul |
10×CBpH7.2 | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul |
Thioglycerol | 60ul | 60ul | 60ul | 60ul |
water | 900ul | 900ul | 900ul | 900ul |
各試劑盒中所含試劑成分
注:如果想觀察細(xì)胞的伸展和遷移,還要加入RGD peptide(單獨(dú)購買);
通過調(diào)整polymer、crosslinker和RGD 肽,可控制水凝膠的彈性、硬度,決定細(xì)胞的張力。
三維水凝膠產(chǎn)品介紹鏈接:http://www.qbioscience。。com/productshow_537.html
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